近年研究显示，环氧化酶不仅是炎症过程中一个重要限速酶，还影响某些恶性肿瘤的发生、发展及预后。bcl作为一种重要的抗凋亡基因，其蛋白产物与许多肿瘤有密切关系。有关bcl异常表达与鼻咽癌(NPC)生物学行为的关系尚不清楚，我们采用免疫组化技术探讨86例NPC组织中上述基因的表达情况，旨在了解它们与NPC临床病理的关系。
1资料与方法
1.1资料选取1995年1月～1997年4月间在我院首程治疗并有5年以上随访的鼻咽癌患者86例。其中男性65例，女性21例；年龄21～72岁，中位年龄46岁。均有明确病理学诊断，病理检查标本于初治前经鼻咽部活检取材。中～高分化鳞癌11例，低分化鳞癌65例，泡状核细胞癌6例，未分化癌4例。根据UICC1997年NPC临床分期标准，Ⅰ期8例，Ⅱ期19例，Ⅲ期35例，Ⅳ期24例。临床治疗以根治性放疗为主。照射范围包括鼻咽、颅底和颈部淋巴结，鼻咽原发灶肿瘤量66～76GY/6.5～7周。
1.2免疫组化染色特异性一抗COX2多克隆抗体、bcl2单抗及免疫组化试剂盒均购自北京中山生物技术有限公司。采用免疫组织化学SP法染色，微波修复抗原，DAB显色，PBS代替一抗作阴性对照。
1.3结果判定标准光镜下COX2、bcl2表达阳性的细胞膜及胞浆呈棕黄色。以随意5个400倍癌巢区阳性细胞所占比率的平均数≤10%计为阴性病例,>10%为阳性病例。
1.4统计学处理采用SPSS10.0统计分析软件，根据数据特征进行χ2检验，Kaplanmeier方法分析生存情况，曲线比较用logrank检验,用COX回归模型做多因素分析。
2结果
2.1临床随访结果至2002年4月，86例患者中有20例出现局部或颈部复发，39例远地转移，5年局部控制率和远地转移率分别为76.7%和45.3%，5年生存率为47.7%。
2.2COX2、bcl2表达与鼻咽癌病理临床各因素关系 全组COX2及 bcl2阳性表达率分别为73.3%（63/86）、84.9%(73/86)。
2.3COX2、bcl2表达与鼻咽癌预后的关系按鼻咽癌活检组织中COX2和bcl2细胞阳性率≤10%组和>10%组绘制生存曲线，两者阳性表达组生存期明显较阴性者短（P=0.042、P=0.032）。COX模型多因素分析显示，COX2、bcl2均与鼻咽癌预后有相关性。
3讨论
COX2是前列腺素合成过程中重要的限速酶，哺乳动物至少有两种同工酶，即COX1和COX2，它们在表达调控、定位分布和功能上有明显不同。COX1在大多数组织和细胞中稳定表达，属结构型表达蛋白。有多种生理功能如保护胃粘膜、维持肾血流等，被称为“管家基因”。而COX2一般只在受刺激时迅速合成，静息时并不表达，被称为“快反应基因”。这种刺激因子可为细胞因子、生长因子、促癌剂等。近年来研究表明，COX2不仅是启动炎症反应的关键酶，而且还参与某些恶性肿瘤的发生和发展过程。临床研究证实，80%～95%的结肠腺癌有COX2蛋白及mRNA水平的增高，而COX1水平无明显变化[1]。除结肠癌组织中COX2高表达外，在胃癌、乳腺癌、肺癌、食管癌等恶性肿瘤中，COX2高表达也常见[25]。本研究表明73.3%的鼻咽癌组织中存在COX2蛋白的过度表达。与组织学类型无关，但与肿瘤分化程度、较短的生存期呈正相关，尤其值得注意的是与原发灶范围和颈淋巴结转移显示出密切关系。NPC颈淋巴结转移率约为70%～80%，咽旁间隙受侵率可达45%～91%，诸多研究表明，原发灶超腔和颈淋巴结转移的局控率和5年生存率明显低于未超腔和无淋巴结转移者，是影响NPC疗效及预后的重要因素，提示有超腔和颈淋巴结转移者在生物学特性上可能有所不同。本组有淋巴结转移和原发灶超腔者COX2阳性表达率明显高于无淋巴转移及未超腔者（P<0.05）,提示COX2可能参与NPC发生发展过程,其机制尚有待进一步探讨，可能与促进细胞增殖、肿瘤血管形成和促进肿瘤细胞浸润等有关。
bcl2基因是20世纪80年代初从滤泡型B细胞淋巴瘤中分离出来的原癌基因,是一种重要的细胞凋亡调节基因/蛋白。目前已经发现bcl2蛋白在一些非造血系统肿瘤中呈异常表达，发挥着抑制细胞凋亡的作用。有关bcl2蛋白表达和鼻咽癌发生发展及预后的关系尚存在较多争论。较多研究认为bcl2原癌基因表达可抑制细胞凋亡。Kenney等证实LMP1可以通过诱导bcl2的表达而抑制p53介导的凋亡。也有研究认为NPC中bcl2表达与LMP1无相关性,也不能抑制鼻咽癌细胞凋亡。本研究结果显示，bcl2蛋白在NPC中表达率与众多文献一致，但值得关注的是bcl2阳性表达与组织学类型、病理分级、原发灶范围、颈淋巴结转移均无明显相关性，但生存≤5年组bcl2阳性率显著高于生存期＞5年组(P<0.05)，说明bcl2在NPC病程中的调控机制较复杂，推测bcl2蛋白的高表达可能与NPC的病因学有关。
综上所述，COX2、bcl2蛋白在鼻咽癌组织中高表达，前者与肿瘤分级、原发灶大小、淋巴结转移及较短的生存期有显著相关性，是一种重要的预后指标，随着COX2选择性抑制剂的临床运用，COX2可望成为鼻咽癌防治的新靶点。bcl2也在一定程度上影响着NPC的预后，但其机制有待深入探讨。
(编辑:刘辉)
