p16基因是一个重要的肿瘤抑制基因，参与细胞周期的调控，控制细胞生长和分化。死亡相关蛋白激酶（deathassociated protein kinase,DAPK）基因是一种钙调蛋白调节的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，是凋亡的正性调节因子之一, 现已发现在多种肿瘤组织存在p16和DAPK基因启动子的甲基化，提示这些基因的甲基化可能与肿瘤的发生发展有关。本文运用甲基化特异性PCR(MSP)技术检测原发性肝癌（PLC）患者血清循环核酸中DAPK基因、p16基因甲基化的状况，并探讨检测血清DAPK基因、p16基因甲基化的临床意义。
DNA异常甲基化的检测已成为探讨肿瘤发生机制的新的研究热点。DAPK基因其产物是钙调素依赖激酶，参与细胞凋亡过程，研究表明其CpG岛异常甲基化可导致基因低表达或缺失可能是参与细胞癌变的重要机制之一。
Alonso等研究证实只有肿瘤组织标本基因高度甲基化阳性，其血液标本才可能阳性。由此可证明循环核酸的来源极可能是肿瘤细胞，而检测循环核酸为非侵入性肿瘤诊断试验提供了可能性。
AFP是数十年来一直沿用的常规血清学检测指标，目前统计数据显示AFP诊断原发性肝癌的阳性率为60％～70%，灵敏度70％左右，有研究表明当血清AFP含量大于45 ng/ml其标本p16甲基化检测也均异常，而血清AFP含量小于或等于45 ng/ml其标本p16甲基化检测57％异常，可以看出DNA甲基化检测比传统血清蛋白肿瘤指标检测更灵敏,更有利于肿瘤早期发现及诊断。本实验中AFP>400ug/L的PLC患者两基因甲基化检出率与AFP<400ug/L的有统计学差异，AFP<400ug/L的（包括AFP正常的）两基因甲基化检出率低于AFP>400ug/L的两基因甲基化检出率。64例PLC患者有93.8%至少一种基因指标阳性，提示p16基因和DAPK基因与AFP联合检测，可明显提高PLC患者的早期发现率。
本研究发现，PLC患者血清DAPK基因、p16基因甲基化检出率分别为40.6％（26/64）、76.6％（49/64），而正常对照组和良性肝部疾病患者组血清未检出DAPK基因、p16基因甲基化，提示检测PLC患者的循环核酸中DAPK基因、p16基因甲基化可作为PLC早期诊断的分子生物学标志物，且其方法基本无创，病人易于接受，从而临床有推广可能，当然也可用于高危人群的筛选确立。
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